《植物生理学报》 2006, 42(1): 87-90

一种定量分析水稻细胞过敏反应的方法

齐放军* 高世强 吴茂森 何晨阳**

中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室，北京100094

通信作者：何晨阳；E-mail: qfj@sdu.edu.cn, cyhe@caas.net.cn；Tel: 010-62896063 010-62894147

摘　要：

在定量分析水稻细胞过敏反应(HR)方法中，溴酚蓝染色法的效果明显优于伊文氏蓝染色法。线形回归分析显示，在0.625~20 mg·mL-1 范围内的溴酚蓝最大光吸收值与其浓度间的相关系数为0.9994。溴酚蓝染色法优化的测定条件为：0.03% 溴酚蓝染色15 min，水洗去除未结合染料，再在50℃下用含50% 甲醇和1% SDS 抽提液抽提与死亡细胞结合的染料30 min，测定抽提液光吸收值(OD595)，以甲醇处理15 min 的细胞作为全杀死细胞参照。用优化方法测定的水稻细胞死亡率与实际死亡率一致。

关键词：水稻细胞；过敏反应；植物病原细菌；溴酚蓝染色法

收稿：2005-05-26   修定：2005-11-23

资助：国家自然科学基金(30571212、30370922)。

一种定量分析水稻细胞过敏反应的方法

齐放军* 高世强 吴茂森 何晨阳**

中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室，北京100094

Corresponding author: ; E-mail: qfj@sdu.edu.cn, cyhe@caas.net.cn; Tel: 010-62896063 010-62894147

Abstract:

在定量分析水稻细胞过敏反应(HR)方法中，溴酚蓝染色法的效果明显优于伊文氏蓝染色法。线形回归分析显示，在0.625~20 mg·mL-1 范围内的溴酚蓝最大光吸收值与其浓度间的相关系数为0.9994。溴酚蓝染色法优化的测定条件为：0.03% 溴酚蓝染色15 min，水洗去除未结合染料，再在50℃下用含50% 甲醇和1% SDS 抽提液抽提与死亡细胞结合的染料30 min，测定抽提液光吸收值(OD595)，以甲醇处理15 min 的细胞作为全杀死细胞参照。用优化方法测定的水稻细胞死亡率与实际死亡率一致。

Key words: 水稻细胞；过敏反应；植物病原细菌；溴酚蓝染色法